来源公众号:师者解忧馆
很多同学一看到遗传与基因工程结合的题就头大。2025年河北高考的压轴题,就把T-DNA插入失活、花粉不育和基因定位这三个难点揉在了一起。今天,我们就把这题拆开来看,把每个空的原理都讲清楚。
一、题目速览
(25河北23)T-DNA插入失活是研究植物基因功能的常用方法,研究者将带有卡那霉素抗性基因的T-DNA插入拟南芥2号染色体的A基因内,使其突变为丧失功能的a基因,花粉中A基因功能的缺失会造成其不育。回答下列问题:
(1)基因内碱基的增添、缺失或___都可导致基因突变。
(2)以Aa植株为___(填“父本”或“母本”)与野生型拟南芥杂交,F1中卡那霉素抗性植株的占比为0,其反交的F1中卡那霉素抗性植株的占比为___。
(3)为进一步验证基因A的功能,将另一个A基因插入Aa植株的3号染色体。仅考虑基因A和a,该植株会产生____种基因型的可育花粉,其中具有a基因的花粉占比为____。该植株自交得到F1。利用图1所示引物P1和P2、P1和P3分别对F1进行PCR检测,电泳结果如图2所示。根据电泳结果F1植株分为Ⅰ型和Ⅱ型,其中Ⅰ型植株占比为____。F1中没有检测到仅扩增出600bp条带的植株,其原因为_____。

(4)实验中还获得了一个E基因被T-DNA插入突变为e基因的植株,e基因纯合的种子不能正常发育而退化。为分析基因E/e和A/a在染色体上的位置关系,进行下列实验:
①利用基因型为AaEE和AAEe的植株进行杂交,筛选出基因型为_____的F1植株。
②选出的F1植株自交获得F2。不考虑其他突变,若F2植株中花粉和自交所结种子均发育正常的植株占比为0,E/e和A/a在染色体上的位置关系及染色体交换情况为_____;若两对基因位于非同源染色体,该类植株的占比为______。除了上述两种占比,分析该类植株还可能的其他占比和原因______:。
二、T-DNA技术:给基因“搞破坏”
在解题之前,我们先快速了解一下题目中提到的核心工具:T-DNA插入失活技术。
什么是T-DNA?
农杆菌有一种特殊的DNA片段,叫T-DNA。科学家可以利用它,把一段外源DNA(比如抗性基因)随机插入到植物的基因组里。如果T-DNA不偏不倚地插入到某个基因的中间,那个基因就被“破坏”了,功能就没了。
这个技术的价值是什么?
通过“破坏”一个基因,观察植物的变化,我们就能推断出这个基因原本负责什么功能。比如,把跟种子休眠有关的基因破坏了,种子就不休眠了,那我们就知道这个基因是控制休眠的。
三、第(1)小题:送分题
问题:基因突变包括哪几种类型?
答案:替换
解析: 这是课本上的基础概念。基因突变是指DNA分子中发生碱基的替换、增添或缺失,而引起的基因结构的改变。所以第一空填“替换”,这题是送分的。
四、第(2)小题:谁当爹?谁当妈?
问题: 以Aa植株为父本或母本,杂交结果有什么不同?
答案:父本; 1/2
解析: 这道题的关键信息只有一个:“花粉中A基因功能缺失(a)会造成其不育”。
先来看父本的情况:
如果Aa植株是父本,它产生的花粉有两种:A和a。但是,含有a基因的花粉是不育的,根本没法受精。能参与受精的花粉只有A一种。所以,与野生型(AA)母本杂交,所有后代的基因型都是AA,没有一个带有卡那霉素抗性基因。因此,抗性植株占比是0。
再来看母本的情况(反交):
如果Aa植株是母本,它的卵细胞(A和a)都是可育的。野生型父本只提供A花粉。杂交后,后代基因型是Aa(有抗性)和AA(无抗性),各占一半。所以,抗性植株占比是1/2。
一句话总结:看到“花粉不育”,先想清楚它影响了哪一方,这是遗传比例计算的关键。
五、第(3)小题:多出来的A基因
问题: 在Aa植株的3号染色体上又插入一个A基因,情况会怎样?
答案:3; 1/3; 2/3;仅含 a 基因的花粉不育,无法形成纯合aa植株
解析: 这个植株的基因型有点复杂。我们可以把它简化:2号染色体上是A和a,3号染色体上是A和“空位”(没有等位基因)。
花粉种类: 它可能产生的花粉基因型有四种:AA、A(空)、Aa、a(空)。其中,含有a基因的a(空)花粉是不育的。所以,可育花粉只有3种:AA、A(空)、Aa。在这3种可育花粉中,含有a基因的是“Aa”这一种,所以占比是1/3。如图:

自交后代与电泳: 这个植株自交时,卵细胞四种都有,都可育。雄配子只有三种。用棋盘法计算后,含有a基因的个体(I型)在所有后代中占2/3。
为什么没有纯合aa? 答案非常简单。因为含有a的花粉不育,所以不可能有a花粉与a卵细胞结合。因此,纯合的aa个体永远无法形成。所以电泳结果中,永远看不到只扩增出600bp条带的植株。
六、第(4)小题:基因定位的终极挑战
问题: 如何判断两对基因(A/a, E/e)在染色体上的位置关系?
答案:AaEe; 两对基因完全连锁且无交换; 1/6; 若两对基因位于一对同源染色体, 且发生了交换,该比例介于0~1/6
解析: 这是最难的题,考的是连锁与交换。
分析题干隐含信息:
(1)e基因纯合的种子不能正常发育而退化,翻译过来:其实就是ee基因型纯合致死的意思。
(2)分析基因E/e和A/a在染色体上的位置关系,翻译过来:判断两对基因是否满足自由组合定律。
(3)若F2植株中花粉和自交所结种子均发育正常的植株占比为0,翻译过来:子二代的基因型中不能有a,a的花粉是不育的,也不能出现e,因为e的两种配子后代就是ee也会出现致死。说人话就是问:子二代中AAEE的这种基因型有不有?如果有,比例是多少?
(4)该类植株还可能的其他占比和原因,翻译过来:除了两对基因位于一对染色体上和位于非同源染色体上外,还有第三种情况是什么?那就只能是连锁基础上的互换了。
第一步:得到双杂合子。
用AaEE和AAEe植株杂交,得到的F1植株基因型一定是AaEe。
第二步:分析F1自交结果。
情况一:完全连锁(无交换)
假设A和e基因在一条染色体上,a和E在另一条上。F1植株(AaEe)产生的雄配子只有两种:A_E_(可育)和a_e(不育)。由于a_e雄配子不育,F2中没有能同时提供A和E的雄配子,也就无法形成花粉和种子都正常的植株。所以,正常植株占比为0。
情况二:独立遗传(非同源染色体)
F1植株(AaEe)产生的雌配子四种,都可育。雄配子中,AE和Ae可育,aE和ae不育。用棋盘法计算后,F2中只有基因型为AAEE的植株才能产生正常的花粉和种子。这种植株在所有F2中占1/6。如图:
| AE | Ae | eE | ae | |
| AE | 1/6 | |||
| Ae | 退化 | 退化 |
情况三:连锁但发生交换
如果A和e原本连锁,但在减数分裂时发生了交叉互换,就会产生少量重组型雄配子,导致F2中正常的植株比例会介于0和1/6之间。
七、核心知识点总结
| 序号 | 关键结论 |
| 1 | 基因突变包括碱基的替换、增添和缺失。 |
| 2 | 花粉不育是遗传比例计算的“开关”,需分清是父本还是母本。 |
| 3 | T-DNA插入失活技术,通过“搞破坏”来研究基因功能。 |
| 4 | 基因定位的核心是分析连锁与交换。 |
| 5 | 连锁无交换时,配子类型极少;独立遗传时,配子类型多样。 |
| 6 | 连锁且交换,会产生介于两种极端情况之间的比例。 |
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