病毒检测（双抗夹心法、胶体金法）

 

来源公众号：生物印记

酶标抗体（双抗夹心法）胶体金法

病毒检测中的双抗夹心法与胶体金法

1. 双抗夹心法

双抗夹心法是一种高特异性和高灵敏度的抗原检测方法，广泛应用于病毒检测。其原理是利用两种针对同一抗原不同表位的特异性抗体，形成“夹心”结构来检测目标抗原。具体步骤如下：

抗体准备：一种抗体标记胶体金（作为示踪剂），另一种抗体固定在检测膜的检测线上。

样本处理：将待测样本滴加到试纸条的样本垫上。

反应过程：样本中的抗原与胶体金标记的抗体结合，形成复合物。该复合物通过毛细作用在试纸条上迁移，到达检测线时，被固定在检测线上的第二种抗体捕获。

结果判断：如果样本中含有目标抗原，检测线上会形成可见的线条，表示阳性结果；若无目标抗原，则检测线上无颜色变化。

2. 胶体金法

胶体金法是一种基于胶体金标记的免疫层析技术，具有快速、简便、无需专业设备等优点。其原理是利用胶体金颗粒作为示踪剂，标记抗体或抗原，通过免疫反应在试纸条上形成可见的颜色变化来判断结果。具体步骤如下：

试纸条制备：将胶体金标记的抗体固定在试纸条的结合垫上，将捕获抗体固定在检测线上。

样本滴加：将待测样本滴加到试纸条的样本垫上。

层析过程：样本通过毛细作用在试纸条上迁移，与结合垫上的胶体金标记抗体结合，形成复合物。

结果读取：当复合物到达检测线时，被固定在检测线上的捕获抗体捕获，形成可见的红色线条，表示阳性结果。

3. 二者的结合

双抗夹心法与胶体金法结合，形成了双抗夹心胶体金免疫层析法，该方法在病毒检测中具有显著优势：

高灵敏度和特异性：通过两种抗体的特异性结合，提高了检测的灵敏度和特异性。

快速检测：整个检测过程通常在10-15分钟内完成，适合快速筛查。

操作简便：无需复杂设备和专业人员，适合现场快速检测。

4. 应用实例

新型冠状病毒检测：利用双抗夹心法和胶体金法，开发了新型冠状病毒抗原检测试剂盒，可在15分钟内完成检测，最低检出限达到1.0×10² TCID₅₀/mL。

HIV检测：HIV-1/2抗体检测试剂盒采用胶体金法，操作简单，反应迅速，适合大规模临床调查。

流感病毒检测：甲型/乙型流感病毒抗原检测试剂盒采用双抗体夹心法和胶体金法，可快速检测鼻腔拭子或口咽拭子样本中的流感病毒。

综上所述，双抗夹心法与胶体金法的结合为病毒检测提供了一种快速、简便、高灵敏度和特异性的检测手段，广泛应用于临床诊断和现场快速检测。

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