六种实验室灭菌方法，你知道几种？

 

来源公众号：分子庄园　作者：木子庄主 

一、高压湿热法

大多数实验室使用高压灭菌作为他们首选的实验室灭菌方法，使用加压蒸汽加热待灭菌的材料。这是一种非常有效的方法，可以杀死所有微生物、孢子和病毒。
高压灭菌是利用高温饱和蒸汽的潜热来进行灭菌。加压蒸汽潜热高；在100°C时，它所持有的热量是相同温度下水的7倍。

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蒸汽在接触到被灭菌的物体时会凝结成水，释放出大量的潜热，这种潜热能够更有效地穿透微生物的细胞，使蛋白质凝固变性，从而杀死微生物。

二、干热灭菌法

干热灭菌主要是通过高温使微生物的蛋白质变性、电解质浓缩引起中毒等方式来杀灭微生物。

干热灭菌是在干燥的环境下进行的，例如在火焰灼烧或者干热空气烘箱中，热的传导是通过空气这个介质。比如，使用酒精灯火焰灼烧接种环，就是利用干热灭菌，能迅速将接种环上的微生物烧死。

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三、过滤除菌法

过滤是无需加热即可快速对溶液或气体进行除菌的好方法，主要用于血清、毒素、抗生素等不耐热生物制品及空气的除菌。过滤器的工作原理是将溶液通过孔径很小而微生物无法通过的过滤器。

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除菌过滤器采用孔径分布均匀的微孔滤膜作为过滤材料，微孔滤膜分为亲水性和疏水性两种，滤膜材质依过滤物品的性质及过滤目的而定。

滤膜孔径一般有0.45μm和0.22μm两种，药品生产中采用的除菌滤膜孔径一般不超过0.22μm。过滤器不得对被滤过成分有吸附作用，也不能释放物质，不得有纤维脱落，禁用含石棉的过滤器。

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如果要过滤的溶液的量比较大，超过500ml，可以采用已灭菌的抽滤瓶，预先垫好0.22um的滤膜。抽滤瓶灭菌前要检查封口用纱布或棉花堵牢；如果量小，用注射器加滤器、0.22微米滤膜过滤。

0.45 um的滤膜一般用于两次过滤的第一层滤膜，以防止0.22um滤膜堵塞。

值得注意的是，病毒和噬菌体可以通过这些过滤器，因此如果这些是一个问题，过滤不是一种好的实验室灭菌方法。

四、使用溶剂除菌

乙醇通常用作消毒剂，但异丙醇更擅长溶解脂质，可能是更好的选择。这两种溶剂都是通过使蛋白质变性起作用的，尽管该过程需要水。因此，为了有效，它们必须稍微稀释，从100%稀释到60-90%，剩下的%是水。

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同样值得注意的是，虽然乙醇和异丙醇擅长杀死微生物细胞，但它们对孢子没有影响。

五、辐射灭菌法

紫外线、X 射线和伽马射线都是对DNA具有深远破坏性影响的电磁辐射，因此它们是极好的消毒工具。就它们的有效性而言，它们之间的主要区别在于它们的渗透率。

紫外线在空气中的渗透性有限，因此消毒只发生在灯周围相当小的区域。但是，它相对安全，并且对于小区域的消毒非常有用。

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X射线和伽马射线的穿透性要强得多，这使得它们更加危险，但它们对于制造过程中塑料物品（例如注射器）的大规模冷灭菌非常有效。

六、气体灭菌法

环氧乙烷可用于对热或湿敏感的设备进行消毒，通常用于对导管和支架等医疗设备进行消毒。

环氧乙烷基本上通过烷基化阻止细胞代谢和复制。由于环氧乙烷很容易被吸收，因此必须在灭菌后对设备进行充气以去除任何残留物。

环氧乙烷具有剧毒，可能会带来许多健康风险。由于它通常用于医疗保健产品，因此一般不在实验室中使用它。

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